Biological Effect of Tagetes Coronopifolia (Asteraceae) Oil Against Diaphorina Citri (Hemiptera: Liviidae)

Abstract

In this study the toxicity and repellent activity of Tagetes coronopifolia essential oil was determined against Diaphorina citri (Hemiptera: Liviidae). T. coronopifolia oil was obtained from the aerial part of an ecotype from Texcoco, Mexico, and processed by hydrodistillation. Nymphs and adults were sprayed with several oil concentrations, and also exposed to Citrus sinensis cv. Valencia leaf discs treated by immersion. Mortality was assessed in both bioassays. Repellency was evaluated by exposing adults to a treated leaf confined in a device at 4,5,6 and 24 hours after application. Adults and nymphs were significantly susceptible to T. coronopifolia oil (P < 0.05), mortality increased with concentration and time of exposure. In nymphs, oil toxicity ≥ 40% was observed starting at 0.01 mg mL^-1, while in adults, it started at 10 mg mL^-1. T. coronopifolia oil caused maximum repellency (92%) with 40mg mL^-1, 4 hours after treatment, but decreased at 24 hours.

Introducción

Las plantas aromáticas se cultivan desde tiempos inmemoria-les con fines farmacéuticos y culinarios. En los últimos años han sido objeto de renovado interés mundial, como fuente de metabolitos secundarios multifuncionales que poseen aplicación como plaguicidas (Mansaray 2000; Dixon 2001; Ottaway 2001). En particular, algunas especies del género Ta-getes (Asteraceae) han probado ser efectivas contra bacterias (Souza et al. 2000; Arenas et al. 2004), hongos (Zygadlo et al. 1994; Romagnoli et al. 2005), nematodos (Reynolds et al. 2000; Ball-Coelho et al. 2003), ácaros (Eguaras et al. 2005) e insectos tales como piojos de la cabeza (Cestari et al. 2004), gorgojos de granos almacenados (Weaver et al. 1994, 1997), áfidos (Tomova et al. 2005; Serrato-Cruz et al. 2008; Tripathi et al. 2009), moscas blancas (Camarillo et al. 2009), dípteros (Perich et al. 1994; Nivsarkar et al. 2001), entre otros. Lo anterior se debe a que sus extractos son ricos en principios activos como el trans-anetol, alilanisol, β-cariofileno y tage-tona, que son tóxicos, repelentes e inhibidores de la reproduc-ción y crecimiento (Saxena y Srivastava 1973; Weaver et al. 1994; Cestari et al. 2004; Tomova et al. 2005; Camarillo et al. 2009; Tripathi et al. 2009).

En México, el género Tagetes está representado por más de la mitad de las especies que existen en América (Turner 1996); la mayoría son aromáticas debido a la presencia de aceites esenciales en toda la planta (Poli et al. 1995). La com-posición de los aceites puede variar con base en la constitu-ción genética de la especie y las condiciones agronómicas en que se desarrollan las plantas (Krishna et al. 2002; Sefidkon et al. 2004).

Tagetes coronopifolia Willd. es una herbácea anual que libera un intenso aroma al estrujarse con la mano. Bajo cul-tivo, puede crecer hasta 1,2 m, lo que potencialmente pue-de significar alta producción de biomasa y rendimiento de aceite con respecto a otras especies de este género (Villarreal 2003). En observaciones de campo las plantas de T. corono-pifolia son poco afectadas por plagas insectiles, lo que su-giere la presencia de compuestos que impiden su infestación (Serrato-Cruz et al. 2008). El aceite de esta especie contiene cuatro compuestos mayoritarios; en tallo y hoja se encuen-tran verbenona, crisantenona, 2-oxo-decanoato de metilo y 6,6-dimetil-2-metil-biciclo [3.1.1] heptan-3ona, dos de ellos también presentes en la cabezuela (Díaz-Cedillo et al. 2013). La verbenona es señalada como repelente contra Dendroc-tonus ponderosae (Hopkins, 1902) (Coleoptera: Curculioni-dae) (Gillette et al. 2009); ovicida contra Musca domestica (L., 1758) (Diptera: Muscidae) y tóxica en adultos de M. do-mestica y Tribolium castaneum (Herbst, 1797) (Coleoptera: Tenebrionidae) (Rice y Coats 1994), pero aun se desconoce el efecto biológico de los otros compuestos.

Los aceites esenciales se han propuesto para el manejo de diferentes plagas. En el caso del psílido asiático de los cítricos, Diaphorina citri (Kuwayama, 1908) (Hemiptera: Li-viidae) (Halbert y Manjunath 2004), se ha estudiado el efecto tóxico del aceite de ajo Allium sativum L. (Lilliaceae) (CL₅₀ = 0,17 µg insecto⁻¹), lavanda Lavandula sp. (Lamiaceae) (0,16 µg insecto⁻¹), cilantro Coriandrum sativum L. (Apiaceae) (0,25 µg insecto⁻¹), tomillo Thymus vulgaris L. (Labiatae) (17,26 µg insecto⁻¹) (Mann et al. 2012) y orégano Lippia gra-veolens Kunth (Verbenaceae) (20 y 40 mg mL⁻¹) (Cázares et al. 2014). El control de este insecto ha recibido gran atención a nivel mundial porque es el vector de la bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus, agente putativo del "Huanglongbing" (HLB), la enfermedad más devastadora de los cítricos (Bové 2006). Para contribuir en la generación de herramientas que permitan un posible manejo sustentable de este insecto cua-rentenario, el presente estudio se realizó con el objetivo de evaluar el efecto tóxico y repelente del aceite de la parte aérea de T. coronopifolia, contra adultos y ninfas de D. citri.

Materiales y métodos

Obtención del aceite esencial de T. coronopifolia.

Se reco-lectaron semillas de un ecotipo de T. coronopifolia de Santa María Tecuanulco, Texcoco, México. Las semillas germina-ron en bandejas con Peat moss (Sunshine®) en el invernade-ro del Instituto de Horticultura de la Universidad Autónoma Chapingo. Seiscientas plantas de un mes de edad, se trasplan-taron en julio de 2012 en una parcela del Campo Experimen-tal Chapingo (19°29.547'N 98°52.470'O; 2.267 msnm). Se colocaron en surcos de 75 cm, con 15 cm de separación entre plantas. Se aplicó un riego al momento del trasplante; des-pués los requerimientos de humedad fueron cubiertos con la lluvia estacional. Las plantas no se fertilizaron y el deshierbe se realizó con azadón. Tres meses después del trasplante (12 de octubre), cuando las plantas se encontraban en floración, se cosecharon 180 kg de materia fresca de la parte área de la planta, de la cual se extrajeron 250 mL de aceite siguiendo el proceso de hidrodestilación descrito por Díaz-Cedillo et al. (2013).

Bioensayos de toxicidad y repelencia de D. citri al aceite esencial de T. coronopifolia.

La cría de insectos y los bio-ensayos para determinar la actividad biológica de los acei-tes se realizaron en el laboratorio e invernadero de Insectos Vectores del Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo, Texcoco, Edo. de México.

Cría de D. citri.

La colonia de D. citri se estableció en inver-nadero (25 ± 5 °C y 12 h de fotoperiodo) con ~1000 adultos (1:1) procedentes de plantaciones de naranja Citrus sinensis cv. 'Valencia', de Cazones de Herrera, Veracruz. Los adultos se introdujeron en jaulas entomológicas (60 x 40 x 60 cm) de madera cubiertas con tela de organza. Previamente, en la jaula se colocaron plántulas de naranja cv. 'Valencia' de ~4 meses de edad, plantadas en bolsas de plástico negro (30 x 30 cm) con sustrato de vermicomposta, tierra de hoja y agrolita (3:2:1). Las hembras ovipositaron sobre las plantas y a los 7 d se retiraron los adultos con un aspirador. Se obtuvieron ninfas de tercer estadio y adultos para la realización de los bioensayos y el mantenimiento de la cría.

Preparación y aplicación del aceite.

El aceite extraído se diluyó en agua destilada para preparar una solución al 10% (peso/volumen). A partir de esta solución se elaboraron con-centraciones de 10 a 0,0001 mg/mL por medio de diluciones subsecuentes del aceite. Con estas diluciones se realizaron bioensayos preliminares con la finalidad de encontrar efec-to máximo y mínimo de mortalidad o repelencia. Siempre se incluyó un testigo a base de agua destilada. Para facilitar la emulsión en todos los tratamientos, incluido el testigo, se añadió Tween 20 al 0,1%. Para cada concentración se em-plearon 20 adultos de 3 a 6 d de emergidos y se realizaron cinco repeticiones. Posteriormente, se seleccionaron siete a ocho concentraciones que representaran adecuadamente todo el rango de mortalidad o repelencia ≥ 40%, de acuerdo con los criterios de Silva et al. (2005).

Toxicidad del aceite esencial en adultos.

Para evaluar el efecto tóxico del aceite en adultos de D. citri, se emplearon 20 adultos de 3 a 6 d de emergidos y 2 h en ayuno previo. Los insectos se anestesiaron con CO₂ por 2 min para facili-tar la aplicación de los tratamientos (Mann et al. 2012); pos-teriormente, con ayuda de un pincel entomológico (000) se colocaron sobre el envés de un disco de hoja de naranja cv. 'Valencia', en una caja Petri (Ø 4,0 cm) a la que previamente se le colocó una base de 3 mm de agar-agar 1%. El disco con los adultos se asperjó con un volumen de 1,5 mL del trata-miento respectivo (100, 60, 40, 20, 10, 3,5 mg mL⁻¹ o agua destilada), mediante el uso de un atomizador manual (5 mL). Las cajas se cubrieron con una tapa que contenía una ventana cubierta con tela de organza, y se mantuvieron en condicio-nes controladas (25 ± 3 °C y 12 h de fotoperiodo) (Cabrera et al. 2010). Para cada concentración se emplearon 20 adultos de 3 a 6 d de emergidos y se realizaron cinco repeticiones. La mortalidad (%) se registró a las 24 y 48 h después de la aplicación. Se consideró individuo muerto a aquel que no re-accionaba al estímulo con un pincel.

Toxicidad del aceite esencial en ninfas.

Para esta evaluación se siguió el método propuesto por Prabhaker et al. (2006), el cual consistió en sumergir un disco (40 mm de diámetro) de hoja de naranja cv. 'Valencia' por 5 s en el aceite de T. coro-nopifolia a concentración de 10, 3,5, 1,0, 0,35, 0,1, 0,035 o 0,01 mg mL⁻¹. Se dejó secar a temperatura ambiente. El disco tratado se colocó con el envés expuesto dentro de una caja Petri (Ø 4,0 cm) de la misma manera que el bioensayo an-terior. Enseguida, se introdujeron de 10 a 15 ninfas de tercer estadio por disco. Las cajas se mantuvieron sobre charolas color blanco y en condiciones controladas (25 ± 3 °C). La mortalidad se evaluó a las 24 h, con ayuda de un microscopio estereoscópico (16x). Al igual que en el ensayo anterior, se emplearon 10 a 15 ninfas y se realizaron cinco repeticiones.

Repelencia del aceite esencial en adultos.

La repelencia se evaluó por el método de inmersión de hoja. Para ello se construyó una arena experimental conformada por un vaso de polipropileno transparente (Cristal®) de 250 mL, con tres orificios (Ø 4,0 cm) dos laterales y uno en el fondo, cubier-tos con tela de organza para favorecer la ventilación. La tapa del vaso se perforó para acoplar un vial de cristal de 2 mL, con agua corriente, en el cual se sumergió y sujetó el peciolo de una hoja de naranja C. sinensis cv. 'Valencia' previamente inmersa por 5 s en la sustancia de prueba (concentraciones de 40, 20, 10, 3,5, 1,0, 0,35 o 0,1 mg mL⁻¹). El vial y hoja se encerraron acoplando la tapa con el vaso en posición inverti-da. Por un orificio lateral (Ø 1,0 cm), tapado con un corcho, se introdujeron 20 adultos de 3 a 6 d de emergidos y 2 h en ayuno previo. Para cada concentración se realizaron cinco re-peticiones y los vasos se dispusieron de manera aleatoria en una cámara bioclimática (25 ± 3 °C). La repelencia, medida por la diferencia entre insectos posados y no posados en las hojas tratadas 4, 5, 6 y 24 h posterior al tratamiento, se expre-só en porcentaje, considerando el total de adultos como 100% en cada repetición.

Análisis estadístico.

En todos los bioensayos se aplicó un diseño completamente al azar. Para cada concentración de los experimentos se realizaron cinco repeticiones, incluyen-do un testigo al que se le aplicó agua destilada más Tween 20 al 0,1%. Los datos obtenidos se sometieron a un análisis de varianza (SAS 2004) y a la prueba de comparación múlti-ple de medias de Tukey (P < 0,05). Posteriormente, se obtu-vieron las líneas de respuesta log dosis-Probit (en mg mL⁻¹) y los valores de la Concentración Letal Media (CL₅₀) y la Concentración de Repelencia Media (CR₅₀). La mortalidad y repelencia obtenida en los tratamientos se corrigió con la observada en el testigo por medio de la ecuación de Abbott (1925). También se determinó el Índice de Repelencia (IR) propuesto por Lin et al. (1990) para comparar el efecto de las dosis mediante la fórmula IR = 2G / (G + P), donde G = % de insectos posados en el tratamiento y P = % de los posados en el testigo. Los índices se clasificaron como: IR = 1 con-centración neutra, IR < 1 concentración repelente, e IR > 1 concentración atrayente.

Resultados y discusión

Toxicidad del aceite esencial en adultos.

La mortalidad de adultos se relacionó con la concentración del aceite esencial y el tiempo de exposición al tratamiento; en general, el aceite de T. coronopifolia provocó mortalidad significativa de adul-tos (P<0,05) respecto al testigo, a partir de la dosis de 10 mg mL⁻¹ (24% a las 24 h y 45% a las 48 h). No obstante, la mor-talidad se incrementó hasta alcanzar el 100%, al aumentar la concentración de 40 a 100 mg mL⁻¹ (Tabla 1). Estos resulta-dos coinciden con los reportados por Cázares et al. (2014) quienes encontraron una mortalidad de adultos del psílido de 70% al aplicar aceite esencial de orégano (L. graveolens) a una concentración de 40 mg mL⁻¹.

La actividad tóxica de otros aceites esenciales de diversas especies de Tagetes con diferentes metabolitos secundarios también fue observada en otros insectos, como la mosquita blanca de los invernaderos (Camarillo et al. 2009), mosca del Mediterráneo (López et al. 2011), gorgojos de granos alma-cenados (Stefanazzi et al. 2011) y piojo humano de la cabeza (Gutiérrez et al. 2009), lo que demuestra el potencial de di-chas especies como fuente de metabolitos secundarios contra plagas.

Tabla 1.

Mortalidad (%) de adultos y ninfas de Diaphorina citri, 24 y 48 h posteriores a la aplicación de diferentes concentraciones del aceite esencial de Tagetes coronopifolia.

Concentración (mg mL⁻¹)	Mortalidad (% ± σ) a
	Adultos		Ninfas
	24 h	48 h	24 h
100	100 ± 0,00 a	100 ± 0,00 a
60	95 ± 1,00 a	100 ± 0,00 a
40	85 ± 3,00 ab	96 ± 0,84 ab	100 ± 0,00 a
20	66 ± 3,11 b	79 ± 1,92 b	96 ± 0,89 a
10	24 ± 1,30 c	45 ± 4,00 c	70 ± 0,71 b
3,5	8 ± 1,52 cd	20 ± 1,58 d	64 ± 0,89 b
1,0			48 ± 0,84 c
0,35			32 ± 0,84 d
0,1			30 ± 0,71 d
0,035
0,01	2 ± 0,89 d	4 ± 1,10 d	4 ± 0,55 c
Testigo
Cv.	17,23	14,62	13,20
CL50	15,02 (11,57-18,89)	9,74 (7,30-12,43)	0,11 (0,041-0,248)
b+s	2,6 ± 0,2	2,6 ± 0,2	0,8 ± 0,1

*

Medias con distinta letra en una columna son estadísticamente diferentes (Tukey, P≤ 0,05). Límites fiduciales, Cv. = Coeficiente de variación, b = Pendiente de la línea de regresión, s = Error estándar, σ = Desviación estándar.

A nivel de CL₅₀, los limites fiduciales a las 24 y 48 h no se traslapan entre sí. lo que indica que con menores concentraciones se alcanza mortalidades mayores a 48 h con respecto a las 24 h. Esto puede estar relacionado con el tiempo que requiere el metabolismo del insecto para desdoblar las moléculas o con la velocidad de acción de las moléculas del aceite en el interior del insecto (Isman 1999; Chiasson et al. 2004).

Toxicidad del aceite esencial en ninfas.

La mortalidad de ninfas se relacionó positivamente con la concentración del aceite de T. coronopifolia. En general, el aceite provocó mor-talidad significativa en ninfas (P < 0,05) respecto al testigo a partir de la concentración de 0,01 mg mL⁻¹ (30%), y se incre-mentó hasta alcanzar el 100% a 10 mg mL⁻¹. A nivel de CL₅₀, se requiere una concentración de 0,11 mg mL⁻¹ para eliminar el 50% de la población de ninfas de D. citri. El aceite fue efectivo para eliminar las poblaciones de ninfas de D. citri a las 24 h, lo que coincide con lo encontrado por varios autores (Weaver et al. 1994, 1997; Serrato-Cruz et al. 2008; Tripathi et al. 2009; Camarillo et al. 2009) en otras plagas, con diversos extractos de Tagetes. Según Hogson y Kuhr (1990) así como Larew y Locke (1990) el aceite probablemente re-move las ceras de la cutícula, por lo que los individuos su-fren deshidratación celular. Al respecto, Sieburth et al. (1998) mencionan que los aceites son más efectivos en el control de la plaga cuando se aplican sobre huevos o primeros estadios ninfales con respecto a los adultos. En general, las ninfas fue-ron más sensibles que los adultos al aceite de T. coronopifolia a nivel de CL₅₀, sin traslape de sus límites fiduciales, lo que indica que a las 24 h después del tratamiento, con menores concentraciones se alcanzan mortalidades mayores en ninfas (CL₅₀ 0,11 mg mL⁻¹) que en adultos (15,02 mg mL⁻¹) e in-cluso que a las 48 h en adultos (9,74 mg mL⁻¹) (Tabla 1).

Repelencia del aceite esencial en adultos.

El aceite esen-cial de T. coronopifolia causó repelencia de adultos >35% y hasta 92% a partir de 3,5 mg mL⁻¹ y hasta 40 mg mL⁻¹ de 4 a 6 h después de la aplicación (excepto a las 6 h con la concentración 3,5 mg mL⁻¹). Los menores IR se dieron en la concentración de 40 mg mL⁻¹, con valores de 0,16 a las 4 h hasta 0,43 a las 6 h (Tabla 2). Todos los demás valores de repelencia, aunque menores a 1,0 fueron superiores a 0,50, es decir tuvieron valores de repelencia bajos a moderados (Lin et al. 1990). Esto ha sido observado para otras especies de Tagetes, en insectos como Trialeurodes vaporariorum (West-wood, 1856) (Camarillo et al. 2009). El efecto repelente dis-minuyó al trascurrir el tiempo de evaluación, ya que con 40 mg mL⁻¹ y 4 postaplicación, la repelencia fue de 92% con un IR de 0,16; mientras que a las 24 h la repelencia fue de 60%, con un IR mayor (0,57); tal respuesta se reflejó en una CR₅₀ de 4,3 mg mL⁻¹ a 4 h después de la aplicación del aceite y au-mentó 2 h más tarde a 10,7 mg mL⁻¹, lo que indica pérdida de la actividad repelente del aceite al paso del tiempo (Tabla 2). Al respecto, Wright (1975) menciona que la repelencia y per-sistencia de los aceites depende de la interacción molecular debida al tamaño y forma de las moléculas presentes en cada producto, así como de su ensamble y permanencia en los re-ceptores sensoriales de las antenas de los insectos. Asimismo, es importante conocer la concentración adecuada para repeler a la población del insecto y no causar un efecto contrario al que se esperaría; como se puede apreciar con los IR, las con-centraciones por debajo de 1,0 mg mL⁻¹ a las 4 h, de 3,5 a las 5 h, y de 20,0 a las 24 h después de la aplicación del aceite mostraron un efecto igual o mayor a 0,80 en el psílido, muy cercano al neutro. Camarillo et al. (2009) y Mendoza-Garcia et al. (2014) indican que en el caso de T. vaporariorum se es-timula la oviposición al aplicar dosis menores de 10 mg mL⁻¹ del aceite esencial de T. filifolia, así como extractos acuosos de Taraxacum officinale Weber (Asteraceae) y etanólicos de Raphanus raphanistrum L. (Brassicaceae) de 60 mg mL^-1.

La propiedad repelente del aceite esencial evaluado pro-bablemente se explique por los múltiples ingredientes activos y modo de acción presentes en ellos, por lo que los aceites pueden ser considerados como de amplio espectro de acción (Chiasson et al. 2004). Altas concentraciones de monoter-penos, como la verbenona presente en muchos aceites esen-ciales, producen un estado de bloqueo sensitivo en áfidos y barrenadores (Jackson et al. 1996; Gillette et al. 2009), lo que podría significar que este tipo de moléculas inhiban la enzima acetilcolinesterasa, vital para la transmisión de estí-mulos en insectos (van Oosten et al. 1990). Por otra parte, según la naturaleza de los estímulos químicos que interactúan con la superficie de la planta, pueden ocasionar que el insecto no pueda reconocer a su planta huésped para alimentarse y reproducirse (Metcalf y Metcalf 1992). Dentro del manejo integrado de plagas, sería muy útil contar con un producto entomoestático, como repelente o inhibidor de crecimiento o de oviposición.

Tabla 2.

Repelencia de adultos de D. citri a las 4, 5, 6 y 24 h post aplicación de diferentes dosis del aceite esencial de Tagetes coronopifolia.

Dosis [mg mL⁻¹]	Rep (%)1	IR2	CI3	Rep (%)	IR	CI	Rep (%)	IR	CI	Rep (%)	IR	CI
		4			5			6			24 h
40	92 a	0,16 ± 0,05	R	81 a	0,33 ± 0,18	R	73 a	0,43 ± 0,15	R	60 a	0,57 ± 0,41	R
20	62 b	0,58 ± 0,23	R	46 b	0,72 ± 0,13	R	35 b	0,79 ± 0,16	R	19 b	0,89 ± 0,19	A
10	60 b	0,60 ± 0,28	R	53 c	0,66 ± 0,21	R	37 b	0,78 ± 0,11	R	18 bc	0,90 ± 0,09	R
3,50	45 bc	0,74 ± 0,23	A	36 d	0,80 ± 0,13	R	27 bc	0,85 ± 0,09	R	17 bc	0,90 ± 0,15	A
1,00	26 cd	0,89 ± 0,26	A	22 d	0,90 ± 0,09	R	15 d	0,92 ± 0,14	A	12 bc	0,93 ± 0,09	A
0,35	35 cd	0,82 ± 0,31	A	27 d	0,86 ± 0,15	A	13 de	0,94 ± 0,05	R	15 bc	0,91 ± 0,12	A
0,10	28 cd	0,87 ± 0,19	A	21 d	0,90 ± 0,1	N	10 cd	0,92 ± 0,08	N	10 bc	0,94 ± 0,10	A
Testigo	8 c			5 e			2 e			0e
CR50		4,31			10,76			28,14
		(1,06-28,91)4			(3,1-167)			(7,2-44,8)
B±s		0,65 ± 0,1			0.58 ± 0.1			0.59 ± 0.1

Medias con distinta letra en una columna son estadísticamente diferentes (Tukey, P<0,05). ¹Rep, Repelencia; IR, Indice de Repelencia; CI, Clasificación del aceite por su efecto (R. Repelente; N, Neutro; A, Atrayente); Limites fiduciales, b = Pendiente de la línea de regresión, s = Error estándar.

Considerando los efectos de mortalidad de ninfas y adul-tos de D. citri, así como la repelencia de adultos producidos con la aplicación del aceite esencial de T. coronopifolia, se recomendaría realizar estudios agronómicos sobre producción de biomasa y de aceite de esta especie, para valorar su po-tencial en la elaboración de bio-plaguicidas y bio-repelentes. El aceite esencial de T. coronopifolia podría presentar un po-tencial para el manejo del psílido, por ser compatibles con otras opciones de bajo riesgo, como feromonas, aceites, jabo-nes, hongos entomopatógenos, depredadores y parasitoides, lo que permitiría su incorporación a un programa de Manejo Integrado de Plagas (Molina 2001). Martínez et al. (2000) mencionan que los insecticidas botánicos actúan de manera moderada en comparación con un insecticida químico debi-do a su rápida degradación en el ambiente y a que algunos artrópodos objetivos sobreviven a la primera aplicación; en contraparte, presentan la ventaja de no acumularse en el am-biente y resultar inocuos.

Conclusiones

El aceite esencial de T. coronopifolia resultó tóxico a adultos y ninfas de D. citri; la toxicidad se relacionó positivamente con la concentración y el tiempo de exposición al tratamien-to. Las ninfas resultaron más susceptibles que los adultos. Las concentraciones mínimas efectivas en laboratorio se es-timaron en 0,01 mg mL⁻¹ para ninfas y 10 mg mL⁻¹ para adul-tos. El aceite causó un efecto repelente de corta duración (≤6 h después de la aplicación).