Abstract
Cytological structural aspects of the nuclear apparatus of Hymenoptera are studied. Chains of nuclei present in striated muscle cells are described. It is pointed out that in adult miofibers rows of independent nuclei are originated by amitotic fragmentation of giant polyploid nuclei.
Introducción
La histogénesis de las fibras musculares estriadas de los insectos constituye un fenómeno citofisiológico complejo que incluye, entre otros procesos, la formación de miofibrillas y la aparición, en la zona central de las cédulas musculares, de una cadena parcialmente contínua de núcleos (Toselli y Pepe 1968; Judy y Marks 1971). A pesar de la considerable cantidad de referencias bibliográficas sobre este tema, existen solamente escasos datos referentes al mecanismo de multiplicación nuclear en el músculo de los insectos. El origen de las células musculares adultas multinucleadas ha sido atribuido a un proceso de amitosis, a un proceso combinado de poliploidía y endomitosis o a un fenómeno de fusión sincicial de células mioblásticas, previamente independientes originadas por mitosis (Maslow 1969; Pessacq 1969; Judy y Marks 1971). En la presente investigación se han llevado a cabo observaciones orientadas al análisis de los núcleos de las fibras musculares estriadas de himenópteros adultos. Esta comunicación se refiere fundamentalmente a aspectos estructurales del aparato nuclear de himenópteros tendientes a indicar que la diferenciación del mismo puede representar una forma especial de crecimiento endomitótico asociado a un proceso de fusión de núcleos originalmente independientes.
Materiales y Métodos
Se estudió citológicamente el tejido muscular de ejemplares adultos de diferentes Himenópteros, especialmente la hormiga Acromyrmex ludi (Guér), Solenopsis saevisima (Richter) y las avispas Polybia scutellaris (White), Sceliphron figulus (Dahlb) y Trypoxylon palliditarse (Sauss). Se eligieron estas especies por su abundancia en las zonas ribereñas de la Provincia de Buenos Aires próximas a La Plata (Llano 1959). El tejido muscular del tórax y de las patas se disecó y se extendió mediante agujas sobre porta objetos albuminizados. Las preparaciones se fijaron por calentamiento moderado a la llama durante 1 - 2 minutos. Se procedió luego a la post fijación en alcohol-acético 3:1, durante 6 - 12 horas a temperatura ambiente. Como procedimiento de coloración se emplearon el método de Giemsa, con una solución al 2% en agua destilada y la técnica de Feulgen para ADN (Langeron 1949; Mc. Manus y Mowry 1960). Luego de lavado rápido en agua destilada y secado al aire, a temperatura ambiente, los extendidos se examinaron con mediano y gran aumento. Las cédulas musculares mejor preservadas en su estructura, se microfotografiaron.
Resultados
Las fibras musculares de Himenópteros poseen un aparato nuclear constituido por una cadena central de núcleos aislados o parcialmente fusionados y conectados por filamentos de cromatina (Fig. 1a)
Esta característica es compartida con otros grupos de insectos, pero en himenópteros es donde mejor se pone en evidencia la fusión parcial de los núcleos. En las especies estudiadas los núcleos gigantes se observaron tanto en estadios larvales como en especímenes adultos. Por el contrario, en dípteros las bandas centrales de cromatina en las células musculares, aparecen con gran frecuencia durante el desarrollo larval pero tienden a desaparecer en ejemplares adultos. Los macronúcleos que se identificaron en las larvas (Fig. 1b), están reemplazados en moscas adultas, por ejemplo, por una cadena central de núcleos independientes que recorren toda la longitud de la fibra muscular (Fig. 2a).
Eventualmente pueden encontrarse series de 2 a 4 núcleos unidos entre si por puentes de cromatina como un vestigio de la disposición embrionaria en cuerdas centrales. En las fibras musculares de Acromyrmex lundi el aparato nuclear aparece enteramente contínuo con gran frecuencia (Fig.la).
Pueden observarse filamentos de interconexión nuclear y en algunos casos se reconocen puentes de heterocromatina negativa, lo que da una imagen de aparente discontinuidad o interrupción de la banda comatínica central cuando se examina con aumentos panorámicos. En Polybia scutellaris y Sceliphron figulus el aparato nuclear del músculo estriado es casi idéntico al descrito en la especie precedente. Algunas pequeñas diferencias pueden ser evidenciadas. Los núcleos se tiñen con menor intensidad, lo que depende de la relativa escasez de corpúsculos heterocromáticos que están siempre presentes en Acromyrmex lundi. En esta especie, el núcleo elongado de las miofibras es de diámetro uniforme (Fig. 2b). Pueden observarse interrupciones a intervalos irregulares. En ocasiones aparecen bandas transversales en los núcleos grandes, tanto de mioblastos como de fibras musculares diferenciadas (Fig. 2c).
Fibra muscular estriada de Acromyrmex lundi en la que se observa la cadena central de núcleos, parcialmente contínua.
Discusión
La existencia de una hilera central de núcleos en células musculares estriadas de insectos es un hecho conocido que ha sido descrito en diferentes especies (Toselli y Pepe 1968: Pessacq 1984). La citogénesis de esta disposición nuclear no ha sido definitivamente aclarada. Algunos autores postulan la teoría sincicial para la formación de las fibras musculares estriadas, mediante fusión de mioblastos mononucleares originalmente independientes (Maslow 1969; Molinaro y Martinozzi 1973). Otras observaciones sugieren que la multinuclearidad resulta de un proceso de división amitótica que acontece en células musculares estriadas en crecimiento (Pessacq 1969). En cultivos de células musculares de vertebrados se ha puesto en evidencia que por lo menos en estadios precoces de diferenciación la multinuclearidad es debida a la fusión de mioblastos (Altschul 1946; Maslow 1969).
Observaciones empleado técnicas autorradiográficas indican que células diferenciadas de Bombyx mori incorporan timidiana tritiada (Komarov 1976). En el presente estudio se señala la existencia de núcleos gigantes elongados en el músculo estriado de himenópteros. La génesis de este sincarión, que se extiende a lo largo de las miofibras, puede interpretarse como resultado de dos procesos celulares diferentes:
Un proceso de endomitosis originando macronúcleos gigantes (Pessacq 1984). Este mecanismo tiene lugar en células musculares diferenciadas a partir de núcleos de la cadena central. Tal proceso de poliploidía correspondería al aumento de longitud de las fibras musculares en el curso de la diferenciación larval. Se han presentado evidencias acerca de la formación de núcleos poliploides en el músculo en crecimiento de Bombyx mori (Komarov 1976). En las presentes observaciones se describe la existencia en células musculares, de núcleos poliploides de gran longitud. La existencia de un proceso de crecimiento endomitótico en células musculares diferenciadas no es imcompatible con el origen de las fibras multinucleadas por un mecanismo de fusión de mioblastos independientes tal como ha sido estudiado en cultivo de tejidos. Probablemente acontece una combinación de dos fenómenos: multinuclearidad por fusión de células independientes y crecimiento ulterior de núcleos de la hilera central por poliploidía y endomitosis (Hort 1953; Risler 1959).
Diferentes aspectos exhibidos por el aparato nuclear en fibras musculares de ejemplares adultos de Avispas. En 
Fusión de los núcleos en hilera de las miofibras. Tal conjugación de núcleos previamente idependientes podría postularse como probable para el origen de los núcleos gigantes en forma de cuerda de las células musculares. La fusión nuclear no es un proceso frecuente en células de metozoarios. Por el contrario, en protistos, la fusión y reorganización de macronúcleos se produce con frecuencia como un fenómeno normal precediendo la división y el enquistamiento (Orias 1991; Raikov 1969, 1982). Un fenómeno comparable es posiblemente responsable, por lo menos en forma parcial, de la formación de estos núcleos alargados. La circunstancia de que sean particularmente frecuentes en estadios larvales durante la miogénesis y su disminución en número en el curso de la maduración post larval, sugiere, por otra parte, la producción de divisiones amitóticas capaces de originar las filas de núcleos independientes observables en miocélulas de insectos adultos.