Abstract
Introducción
El salivazo de la caña de azúcar,
Los salivazos se caracterizan porque las ninfas se recubren de una sustancia espumosa y viscosa con apariencia de saliva que sirve de defensa de enemigos naturales y como protección de condiciones climáticas adversas (Thompson y González 2005). La producción de espuma la llevan a cabo una vez que inician su alimentación en los tejidos del xilema principalmente en la raíz o en la parte basal de los tallos. Los adultos introducen su estilete en las hojas hasta alcanzar el xilema e inyectan una toxina que produce necrosis del tejido foliar causando un secamiento de la hoja (Gómez 2007). El ciclo de vida de
Para el control del salivazo de la caña de azúcar,
Especies de los géneros
Teniendo en cuenta las consideraciones anteriores, el objetivo de este trabajo fue establecer la virulencia de varias especies de nematodos entomopatógenos sobre ninfas y adultos de
Materiales y Métodos
Este trabajo se realizó bajo condiciones de laboratorio (24 ± 0,7 °C y 70 ± 3% HR) e invernadero (26,6 ± 0,85 °C y 70,7 ± 4,3% HR) en las instalaciones del Centro Agropecuario del Sena en Buga, Valle del Cauca, ubicado a 3°54′07″N y 76°18' 4"O y 969 msnm, donde se encuentra establecida una cría masiva de
Las especies de nematodos evaluadas fueron
Bioensayos de virulencia sobre ninfas de A. varia
Estudios previos sobre ninfas en condiciones de laboratorio (datos no publicados) mostraron una mortalidad natural alta por falta de raíces secundarias en las plantas para la alimentación del insecto por lo cual fue necesario realizar los ensayos directamente en invernadero.
Las unidades experimentales se conformaron con plántulas de caña de azúcar variedad CC 85-92 sembradas en recipientes de PVC de 6 cm de diámetro y 7 cm de alto. Estos recipientes contenían suelo estéril (suelo + arena 3:1). Ocho días después de la infestación de las plántulas con huevos de
Ninfa de
Se utilizó un diseño completamente aleatorio con 12 tratamientos y un testigo (seis especies de nematodos, en dos dosis), cada tratamiento constó de diez repeticiones y cada una estuvo conformada por cinco ninfas. Para establecer las diferencias entre tratamientos se realizó un análisis de varianza al 95% de confiabilidad y para establecer diferencias entre tratamientos se realizo la prueba de comparación de medias de Duncan (SAS 2005). El análisis estadístico se realizó para cada estadio.
Bioensayos de virulencia sobre adultos de A. varia
Se confinaron tres adultos tenerales de
Además, se realizaron observaciones sobre la producción de los nematodos en el 50% de los individuos muertos colocándolos en cámara "White" modificada (Kaya y Stock 1997). El 50% restante de los individuos se diseccionaron, determinando el número de nematodos que lograron parasitar cada insecto. Se realizó un segundo bioensayo donde plántulas de caña de azúcar y tres tenerales se introdujeron en un cilindro de acetato transparente cubierto en la parte superior e inferior con tela de tul y a las cuales se asperjó 100 JI/cmβ, tanto en suelo como en el follaje determinando el porcentaje de mortalidad de los adultos. Las evaluaciones de la mortalidad de
Los bioensayos se organizaron bajo un diseño completamente aleatorio con seis tratamientos y un testigo (seis especies de nematodos aplicados en una dosis). Cada tratamiento constó de diez repeticiones y cada una estuvo conformada por tres adultos. La información se analizó a través de un análisis de varianza al 95% de confiabilidad y para establecer diferencias entre tratamientos se realizó la prueba de comparación de medias de Duncan (SAS 2005).
Capacidad de búsqueda de los nematodos
Se utilizó un sistema de bioensayo para desplazamiento horizontal, que consistió de tubos de polivinil cloruro (PVC) de 7 cm de diámetro por 7 cm de largo. Tres de estas secciones se unieron para formar un fragmento de desplazamiento de 21 cm de largo. Estas secciones fueron denominadas como atracción (sección de desplazamiento de los JI´s hacia el insecto), estático (sección del punto de liberación de los JI's) y repulsión (sección comprendida entre el punto de liberación y la opuesta a la presencia del insecto). Estos recipientes contenían suelo estéril (suelo + arena 3:1) a capacidad de campo y en un extremo se encontraba una plántula de caña de azúcar infestada con cinco ninfas de
Cinco días después de aplicados los nematodos se extrajo y se estimó el número de JI's presentes en cada sección del suelo, mediante conteos de JI´s utilizando el método de tamizado y decantación de Cobb (1918) modificado para la recuperación de los nematodos. Para cada sección se realizaron 10 conteos. Además, se determinó el número de ninfas muertas y el de nematodos que lograron parasitar cada insecto.
El diseño experimental para este ensayo fue completamente aleatorio con seis tratamientos y un testigo (seis especies de nematodos, una dosis). Cada tratamiento tuvo 10 repeticiones y cada una se conformó por cinco ninfas, para un total de 50 individuos por tratamiento. Se realizó un análisis de varianza al 95% de confiabilidad y las diferencias entre tratamientos se establecieron mediante una prueba de comparación de medias de Duncan (SAS 2005).
Resultados y Discusión
Bioensayos de virulencia sobre ninfas de A. varia
En la evaluación de la virulencia de nematodos entomopatógenos (NEPs) sobre ninfas de I estadio se presentó mortalidad solo con la especie
Mortalidad (%) de ninfas de diferentes estadios de
Sw:
D1 = 100 JI/cmβ, D2 = 1.500 JI/cmβ
Datos seguidos de la misma letra en la misma fila no difieren significativamente de acuerdo con la prueba de Duncan (P < 0,05).
En la evaluación de la virulencia de NEPs sobre ninfas de IV estadio, hubo diferencias estadísticas significativas (F = 0; g.l. = 1; P = 0,0001) en cuanto a la mortalidad entre las especies de nematodos, sin embargo, no hubo diferencias significativas entre dosis evaluadas para cada especie (F = 0; g.l = 1; P = 0,9849) (Tabla 1). El estadio IV fue el más susceptible a la infección por nematodos con mortalidades hasta de 89,1%. La mayor virulencia la presentó
En la evaluación sobre ninfas de V estadio, las diferencias en la mortalidad entre especies de nematodos fueron significativas (F = 0,24; g.l. = 1; P = 0,0059) así como en las dosis (F = 6,8; g.l = 1; P = 0,0089). Los mayores porcentajes de mortalidad se obtuvieron con la dosis más alta (1.500 JI/cmβ), destacándose
Las mortalidades al terminar el estadio ninfal V fueron bajas, pero cuando se continuó la observación sobre las ninfas que sobrevivieron hasta el estado adulto, se encontró que todos murieron por infección de los nematodos. Esto indica que aplicaciones de los nematodos cuando el insecto está en V estadio, pueden reducir la población por que estos nematodos pueden actuar en el estado adulto. Sin embargo, se debe tener en cuenta que los adultos permanecieron confinados sin oportunidad de continuar su hábito alimenticio en las hojas y de esta manera se obligaron a estar en contacto con los nematodos.
Las evaluaciones sobre los diferentes estados ninfales de
La susceptibilidad asociada a la edad que se observó en las ninfas de
Una posible explicación sobre la reducción en el parasitismo de
Las ninfas de IV estadio, que fueron más susceptibles a la infección por nematodos, se podrían considerar como un estado intermedio en donde los factores como las aberturas naturales, la defecación, el grosor de la cutícula, el sistema inmune, la producción de CO2 y kairomonas, no fueron una limitante para que los nematodos causaran infección. Estos aspectos deben estudiarse para que permitan dilucidar los mecanismos de acción que hacen que ninfas de IV estadio sean más susceptibles y si este comportamiento ocurre para las diferentes especies de salivazos y nematodos entomopatógenos.
Estudios llevados a cabo con otros insectos para determinar el estado de desarrollo más susceptible a nematodos entomopatógenos, muestran resultados disimiles. Koppenhöfer y Fuzy (2004) encontraron que la eficacia de
En cuanto a las dosis, se presentaron diferencias significativas en las mortalidades causadas por
Número promedio de juveniles infectivos de nematodos que parasitaron estados de
Sw:
** D1 = 100 JI/cmβ, D2 = 1500 JI / cmβ
En cuanto a la penetración de los nematodos entomopatógenos y para el caso específico de
La reproducción de los nematodos solo se registró en ninfas de IV estadio, debido a que fue donde se presentó la mayor mortalidad y, por lo tanto, los insectos muertos permitieron hacer observaciones sobre penetración y reproducción de los nematodos. La mayor producción de nematodos se registró con
Sintomatología de ninfas de V estadio de
Número promedio de juveniles infectivos de nematodos emergidos del IV estadio y de adultos de
Sw:
Bioensayos de virulencia sobre adultos de A. varia
El estado adulto de
Mortalidad (%) acumulada de adultos de
Los JI's de todas las especies de nematodos evaluadas se reprodujeron en los adultos de
Capacidad de búsqueda
En relación con la prueba de movilidad de los nematodos hacia la zona de presencia de ninfas de
Porcentaje de nematodos entomopatógenos que se acercaron se alejaron con respecto a ninfas de
Sw:
** Números seguidos de la misma letra en las columnas no son significativamente diferentes de acuerdo con la prueba de Duncan (P < 0,05).
Número promedio de JI de las especies de nematodos que penetraron el cuerpo de ninfas de IV estadio de
Mortalidad (%) de ninfas de
El desplazamiento registrado en este estudio pudo ser influido por la atracción de los nematodos hacia los volátiles presentes en la espuma o saliva que las ninfas expulsan una vez que inician su alimentación. En este sentido, Grewal et al. (1993) investigaron la respuesta de nematodos entomopatógenos a las heces de hospederos naturales y de laboratorio y encontraron que los JI de
Conclusiones
Los nematodos entomopatógenos evaluados penetraron ninfas y adultos de
Footnotes
Agradecimientos
Los autores agradecen a Cenicaña, al Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural y la Universidad Nacional de Colombia - sede Palmira, por contribuir a la realización de esta investigación. A Cenicafé por donar cinco especies de nematodos utilizadas en este estudio. Al Centro Agropecuario SENA - Buga, por facilitar sus instalaciones para la realización de esta investigación y Alberto Palma de Cenicaña, por su asesoría en los análisis estadísticos.