Abstract
Gender differences in a mouse model of chemotherapy-induced neuropathic pain
Naji-Esfahani H, Vaseghi G, Safaeian L, Pilehvarian A-A, Abed A, Rafieian-Kopaei M. Lab Anim 2016; 50: 15–20
Différences selon le sexe des souris dans la douleur neuropathique provoquée par la chimiothérapie
La douleur neuropathique provoquée par la chimiothérapie est l’un des principaux problèmes observés chez les patients atteints de cancer. Or, bien que le paclitaxel et la cisplatine soient couramment utilisés chez les femmes, la plupart des études en laboratoire sur la douleur neuropathique provoquée par la chimiothérapie ont été menées sur des animaux mâles. La présente étude a donc examiné chez les souris les différences observées selon le sexe dans la douleur neuropathique consécutive à la chimiothérapie. Les douleurs neuropathiques ont été provoquées par une injection intrapéritonéale de paclitaxel (2 mg/kg) pendant cinq jours consécutifs, et de cisplatine (1 mg/kg) pendant sept jours consécutifs. L’allodynie au froid a été évaluée en mesurant la fréquence de rétraction de la patte et la durée de léchage de la patte par les souris; l’allodynie mécanique a en revanche été mesurée à l’aide des filaments de von Frey. Les douleurs neuropathiques sont apparues au bout de quelques jours (P < 0,001). L’allodynie au froid était plus prononcée chez les souris femelles (P < 0,001) traitées au paclitaxel, tandis qu’aucune différence entre les deux sexes n’a été observée concernant l’allodynie mécanique provoquée par l’administration du paclitaxel. Fait intéressant, aucune différence entre les deux sexes n’a été observée lors des tests relatifs aux allodynies mécaniques et au froid provoquées par l’administration de cisplatine. En conclusion, le sexe des souris joue un rôle majeur dans l’apparition des douleurs neuropathiques consécutives à la prise de paclitaxel. Les différences observées entre les mâles et les femelles devront être prises en compte dans les prochaines études et les résultats devront être généralisés à l’ensemble de la population humaine avec prudence.
sexe, chimiothérapie, douleur neuropathique
Geschlechtsunterschiede bei einem Mausmodell für Chemotherapie-bedingten neuropathischen Schmerz
Chemotherapie-bedingter neuropathischer Schmerz ist eines der Hauptprobleme für Krebspatienten. Paclitaxel und Cisplatin finden häufig bei weiblichen Patienten Einsatz, die meisten Laborversuche zu Chemotherapie-bedingtem neuropathischem Schmerz erfolgten bisher jedoch mit männlichen Labortieren. Die vorliegende Studie befasste sich mit den Geschlechtsunterschieden Chemotherapie-bedingten neuropathischen Schmerzes bei Mäusen. Neuropathischer Schmerz wurde durch intraperitoneale Injektion von Paclitaxel (2 mg/kg) an fünf aufeinanderfolgenden Tagen und Cisplatin (1 mg/kg) an sieben aufeinanderfolgenden Tagen herbeigeführt. Kaltallodynie wurde durch Messen der Häufigkeit des Pfotenzurückziehens und Dauer des Pfotenleckens bei Mäusen bewertet, während mechanische Allodynie mittels Von-Frey-Haar gemessen wurde. Neuropathischer Schmerz begann sich nach einigen Tagen zu manifestieren (P < 0,001). Während Kaltallodynie ausgeprägter bei mit Paclitaxel behandelten weiblichen Mäusen (P < 0,001) war, wurden bei den Tests zur Erzeugung von mechanischer Allodynie durch Paclitaxel keine Unterschiede zwischen den Geschlechtern festgestellt. Interessanterweise wurden bei den Tests zur Erzeugung von Kalt- und mechanischer Allodynie mit Cisplatin keine Unterschiede zwischen den Geschlechtern beobachtet. Schlussfolgernd ist festzuhalten, dass Geschlechtsunterschiede eine wesentliche Rolle bei durch Paclitaxel verursachtem neuropathischem Schmerz spielen. Die Unterschiede zwischen männlichen und weiblichen Tieren sollten bei künftigen Untersuchungen berücksichtigt werden, und die gewonnenen Ergebnisse sind mit entsprechender Vorsicht auf den Menschen anzuwenden.
Geschlecht, Chemotherapie, neuropathischer Schmerz
Diferencias de sexo en modelos de ratón de dolor neuropático inducido por quimioterapia
El dolor neuropático inducido por quimioterapia es uno de los principales problemas de los enfermos de cáncer. A pesar de que paclitaxel y cisplatino se utilizan de forma generalizada en mujeres, la mayoría de estudios de laboratorio sobre el dolor neuropático inducido por la quimioterapia se han llevado a cabo en animales machos. El presente estudio examinó las diferencias de sexo en el dolor neuropático inducido por la quimioterapia en ratones. El dolor neuropático fue inducido por una inyección intraperitoneal de paclitaxel (2 mg/kg) durante cinco días consecutivos, y cisplatino (1 mg/kg) durante siete días consecutivos. La alodinia fría fue evaluada midiendo la frecuencia de retirada de la pata y la duración de los lametones de las patas en los ratones; no obstante, la alodinia mecánica fue evaluada por filamentos von Frey. El dolor neuropático empezó a manifestarse transcurridos unos días (P < 0,001). La alodinia fría fue más robusta en los ratones hembra (P < 0,001) tratados con paclitaxel, mientras que no se observaron diferencias entre los dos sexos en la manifestación de alodinia mecánica inducida por paclitaxel. Cabe destacar, que no se observaron diferencias entre sexos en las pruebas de alodinia mecánica y fría inducida por cisplatino. En conclusión, las diferencias entre sexos tienen un papel fundamental en el dolor neuropático inducido por paclitaxel. Las diferencias entre animales macho y hembra deberían tenerse en cuenta en estudios futuros y las conclusiones deberían generalizarse en humanos con precaución.
sexo, quimioterapia, dolor neuropático
Effects of type of light on mouse circadian behaviour and stress levels
Alves-Simoes M, Coleman G, Canal MM. Lab Anim 2016; 50: 21–29
Effets des différents types de lumière sur les rythmes circadiens et les niveaux de stress chez la souris
La lumière représente le principal facteur environnemental de la synchronisation de l’horloge biologique. La quantité de lumière (l’intensité) et la qualité de la lumière (le type de source lumineuse) peuvent produire différents effets. L’objectif de cette étude consistait à déterminer les effets des différents types de lumière rencontrés par les souris depuis leur naissance sur leur développement, leurs rythmes circadiens et leurs niveaux de stress. Pendant la période d’allaitement, des souris pigmentées et albinos ont été soumises à des cycles jour/nuit de 24 heures présentant une source lumineuse fluorescente ou à diodes électroluminescentes (LED) blanches, et ont ensuite été exposées à différentes conditions d’éclairage après leur sevrage, avant que soient mesurés leur taux de croissance, leur activité locomotrice et leurs taux plasmatiques de corticostérone. Il a été découvert que le type de lumière auquel étaient exposées les souris n’avait aucune incidence sur leur taux de croissance ou leurs niveaux de stress. Des effets importants ont toutefois été observés sur les rythmes de l’activité locomotrice des souris pigmentées au cours des cycles jour/nuit faiblement contrastés, mais aussi chez les souris albinos et pigmentées soumises à un éclairage permanent. Ces résultats soulignent l’importance de la qualité de l’environnement lumineux (la source de lumière) pour les rythmes circadiens et la nécessité d’un suivi étroit des environnements lumineux au sein des animaleries.
souris, albinos, pigmenté, lumière fluorescente, lumière LED
Auswirkungen von Beleuchtungsarten auf zirkadianes Verhalten und Stressniveau von Mäusen
Licht ist der wichtigste synchronisierende Umgebungsfaktor für die biologische Uhr. Lichtquantität (Intensität) und Lichtqualität (Art der Lichtquelle) können unterschiedliche Auswirkungen haben. Das Ziel dieser Studie bestand darin, die vom Zeitpunkt der Geburt an erlebten Auswirkungen von Lichtarten auf Mauswachstum, zirkadianes Verhalten und Stressniveau zu bestimmen. Wir hielten während der Säugephase pigmentierte und Albinomäuse in 24-stündigen Hell-Dunkel-Zyklen unter Einsatz von Neon- oder Weißlicht-Dioden (LED). Nach dem Absetzen wurden die Tiere unterschiedlichen Lichtbedingungen ausgesetzt und ihre Wachstumsrate, motorische Aktivität und Corticosteron-Konzentration im Blut gemessen. Wir stellten fest, dass die Art der Beleuchtung, der die Tiere ausgesetzt wurden, keinen Einfluss auf Wachstumsrate oder Stressniveau hatte. Hingegen beobachteten wir signifikante Auswirkungen auf die Ausprägung des Rhythmus motorischer Aktivität unter Niedrigkontrast-Hell-Dunkel-Zyklen bei pigmentierten Mäusen und unter konstanter Beleuchtung sowohl bei Albino- als auch bei pigmentierten Mäusen. Diese Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung der Lichtqualität der Umgebung (Lichtquelle) für zirkadiane Verhaltensrhythmen sowie die Notwendigkeit einer strengen Überwachung der Lichtbedingungen in Tiereinrichtungen.
Maus, Albino, pigmentiert, Neonlicht, LED-Beleuchtung
Efectos del tipo de luz en el comportamiento circadiano y en los niveles de estrés de ratones
La luz es el principal factor medioambiental sincronizador para el reloj biológico. La cantidad de luz (intensidad) y la calidad de luz (tipo de fuente de luz) pueden tener efectos distintos. El objetivo del presente estudio fue determinar los efectos del tipo de luz experimentados desde el momento del nacimiento en el crecimiento del ratón, el comportamiento circadiano y los niveles de estrés. Criamos ratones albinos y pigmentados en ciclos de 24 h luz-oscuridad con fuentes de luz blanca con diodo emisor de luz (LED) o fluorescentes durante la fase lactante, luego se expusieron a los animales a varios entornos lumínicos después del destete y se midió su ritmo de crecimiento, actividad locomotora y la concentración de corticosterona plasmática. Encontramos que el tipo de luz al que se exponían a los animales no tuvo ningún efecto en el ritmo de crecimiento y en los niveles de estrés de los mismos. No obstante, observamos efectos significativos en la expresión del ritmo de la actividad locomotora bajo ciclos de contraste luz-oscuridad en ratones pigmentados, y bajo luz constante en ratones pigmentados y albinos. Estos resultados destacan la importancia de la calidad de luz medioambiental (fuente de luz) en los ritmos de comportamiento circadiano, y la necesidad de llevar a cabo un control exhaustivo de los entornos de luz en las instalaciones para animales.
ratón, albino, pigmentado, luz fluorescente, luz LED
Assessing the welfare of laboratory mice in their home environment using animal based measures – a benchmarking tool
Spangenberg EMF, Keeling LJ. Lab Anim 2016; 50: 30–38
Évaluer le bien-être des souris de laboratoire dans leur environnement habituel au moyen de mesures axées sur les animaux comme outils d’évaluation comparative
Les problèmes de bien-être des souris de laboratoire peuvent être la conséquence d’une expérimentation en cours ou la caractéristique d’une lignée génétique particulière, mais dans certains cas, par exemple chez les animaux reproducteurs, ils sont le plus souvent liés à l’agencement et à l’entretien des cages. L’évaluation de l’environnement des cages est fréquemment réalisée au moyen de mesures reposant sur des ressources, par exemple l’accès aux matériaux de nidification. Néanmoins, les mesures axées sur les animaux (qui sont liées à l’état de santé et au comportement de ces derniers) peuvent être utilisées pour évaluer le bien-être réel des animaux quelles que soient les données utilisées (ex: les ressources ou leur gestion). L’objectif de cette étude visait à concevoir un protocole permettant d’évaluer le bien-être des souris de laboratoire en utilisant uniquement des mesures axées sur les animaux. Ce protocole, qui doit être utilisé comme un outil d’évaluation comparative, analyse le bien-être des souris au sein des cages et ne contient aucun paramètre lié à des situations expérimentales. Il est fondé sur les paramètres correspondant aux 12 critères établis en matière de bien-être dans le cadre du projet Welfare Quality®. Le choix des mesures axées sur les animaux a été effectué en passant en revue les protocoles informels, ceux ayant fait l’objet d’une publication et ceux disponibles sur la Toile, et en sélectionnant des paramètres répondant à ces critères, applicables dans la pratique et, si possible, qui constituaient déjà des indicateurs validés en matière de bien-être des souris. Ces paramètres doivent permettre d’identifier d’éventuels problèmes liés au bien-être des animaux et de réaliser une évaluation directement dans les salles où ils sont installés, au cours du processus de nettoyage des cages, et sans devoir faire usage d’équipements supplémentaires. Les comportements liés au confort thermique et les états émotionnels positifs sont des domaines dans lesquels il serait nécessaire d’effectuer des travaux de recherche supplémentaires afin d’identifier des mesures axées sur les animaux qui soient valables, fiables et concrètes.
bien-être des animaux de laboratoire, évaluation du bien-être, logement, élevage, techniques de manipulation, éducation
Bewertung von tiergerechter Haltung und Wohlbefinden von Versuchsmäusen in ihrer heimischen Umgebung mittels tierbezogener Indikatoren – ein Benchmarking-Instrument
Probleme im Zusammenhang mit dem Wohlbefinden von Labormäusen können sich als Folge laufender Versuche einstellen oder Kennzeichen einer bestimmten genetischen Linie sein, doch in manchen Fällen, wie bei Zuchttieren, treten sie höchstwahrscheinlich im Ergebnis von Gestaltung und Management der Unterbringung auf. Bewertungen der Haltekäfigumgebung erfolgen häufig mittels ressourcenbezogener Indikatoren, wie Zugang zu Nestmaterial. Doch können auch tierbezogene Indikatoren (in Abhängigkeit vom Gesundheitszustand und Verhalten der Tiere) genutzt werden, um das derzeitige Wohlbefinden von Tieren und eine tiergerechte Haltung unabhängig von Mitteleinsatz und Aufwand (d. h. Ressourcen oder Management) zu bewerten. Das Ziel dieser Studie bestand darin, ein Protokoll zur Bewertung des Wohlbefindens von Versuchsmäusen lediglich unter Nutzung tierbezogener Indikatoren zu erstellen. Dieses Protokoll, das als Benchmarking-Instrument dienen soll, bewertet das Wohlbefinden von Mäusen im heimischen Käfig und enthält keine versuchsrelevanten Parameter. Es basiert auf Parametern, die den 12 vom Welfare Quality® Projekt aufgestellten Tierschutzkriterien entsprechen. Es wurden tierbezogene Indikatoren aus publizierten, webbasierten und informellen Protokollen ausgewählt, und zwar solche, die diesen Kriterien entsprachen, praktikabel waren und möglichst bereits als bewährte Indikatoren für artgerechte Maushaltung gelten. Die Parameter sollten potenzielle Probleme mit der Tiergerechtheit identifizieren und die Bewertung direkt in einer Tierunterbringung während der Käfigreinigung und ohne Erfordernis zusätzlicher Ausrüstung ermöglichen. Die Bereiche Wärmekomfortverhalten und positive emotionale Zustände bedürfen noch weiterer Untersuchungen, um gültige, verlässliche und praktikable tierbezogene Indikatoren zu ermitteln.
Wohlbefinden von Versuchstieren, Tiergerechtheitsbewertung, Unterbringung, Tierhaltung, Verfahren, Vervollkommnung
Evaluación del bienestar de los ratones de laboratorio en su entorno de alojamiento utilizando mediciones basadas en animales: una herramienta de referencia
Los problemas de bienestar en ratones de laboratorio pueden ser una consecuencia de un experimento en curso, o una característica de una línea genética en particular, pero en algunos casos, como en animales de cría, es más probable que sean el resultado del diseño y la gestión de la jaula de alojamiento. Normalmente se lleva a cabo una evaluación del entorno de la jaula de alojamiento utilizando medidas basadas en recursos, como acceso al material de anidamiento. No obstante, pueden utilizarse medidas basadas en animales (en relación al estado de salud y al comportamiento de los animales) para evaluar el bienestar actual de los animales independientemente de las aportaciones aplicadas (es decir, los recursos o gestión). El objetivo de este estudio fue diseñar un protocolo para evaluar el bienestar de ratones de laboratorio utilizando únicamente medidas basadas en animales. El protocolo, a ser utilizado como una herramienta de referencia, evalúa el bienestar de los ratones en la jaula de alojamiento y no contiene parámetros relacionados con situaciones experimentales. Se basa en parámetros correspondientes a los 12 criterios de bienestar establecidos por el proyecto Welfare Quality®. Se llevó a cabo una selección de medidas basadas en animales analizando protocolos informales, en Internet y publicados, y eligiendo parámetros que correspondieran a estos criterios, que fueran factibles y, en la medida de lo posible, que ya fueran indicadores validados del bienestar de los ratones. Los parámetros debían identificar posibles problemas de bienestar en animales y permitir una evaluación directa en salas de animales durante los procedimientos de limpieza de jaulas, sin la necesidad de equipos adicionales. Los comportamientos de confort termal y estados emocionales positivos son áreas que requieren más investigación para encontrar medidas basadas en animales que sean factibles, fiables y válidas.
bienestar de animales de laboratorio, evaluación de bienestar, alojamiento, cría de animales, técnicas de manipulación, refinamiento
The effect of Syphacia muris on nutrient digestibility in laboratory rats
Plachý V, Litvinec A, Langrová I. Lab Anim 2016; 50: 39–44
Effet du parasite intestinal Syphacia muris sur la digestibilité des aliments chez les rats
Cette étude a été réalisée afin de découvrir de quelle manière les infections parasitaires chez les rats causées par les oxyures pouvaient affecter la digestibilité des aliments par les hôtes. Vingt-quatre rats Wistar mâles obtenus par croisement éloigné ont été répartis de manière aléatoire dans deux groupes de 12 rats. Les rats du premier groupe (GI) ont été placés dans des cages comprenant des litières contenant des œufs d’oxyure, et les rats du deuxième groupe (groupe témoin, GII) ont été placés dans une autre salle, au sein de cages propres, non contaminées et possédant des couvre-filtres. Les animaux ont par la suite été placés dans des cages métaboliques individuelles. Les essais en cages métaboliques ont duré cinq jours, pendant lesquels le poids des animaux, les aliments ingérés et le poids des matières fécales ont été mesurés quotidiennement. Les valeurs de digestibilité ont pu être déterminées sur la base d’une analyse en laboratoire du contenu des aliments et des matières fécales mesurés. Les animaux ont été euthanasiés au 15e jour de l’expérience. Bien que le parasite Syphacia muris ait été identifié chez tous les rats du groupe GI, les animaux n’ont présenté aucun signe clinique. Lors de l’expérience, l’infection au parasite Syphacia muris a, de manière globale, réduit la digestibilité de tous les aliments mesurés (P < 0,01). Les principales différences observées en termes de digestibilité concernaient les fibres crues et les corps minéraux (P < 0,01).
rat de laboratoire, Syphacia muris, infection, aliment, digestibilité
Auswirkungen von Syphacia muris auf Nährstoffverdaulichkeit bei Laborratten
Mit dieser Studie sollte untersucht werden, inwiefern eine Infizierung von Ratten mit Madenwürmern die Nährstoffverdaulichkeit bei den Wirten beeinflusst. Vierundzwanzig männliche Auszucht-Wistarraten wurden willkürlich in zwei Gruppen von je 12 Ratten eingeteilt. Die Ratten der ersten Gruppe (GI) wurden in Käfigen mit Madenwurmeier enthaltender Einstreu untergebracht, die zweite Gruppe (Kontrollgruppe, GII) wurde in einem getrennten Raum in reinen, nicht kontaminierten Käfigen mit Filterabdeckung gehalten. Die Tiere wurden später in Stoffwechsel-Einzelkäfigen untergebracht. Die Stoffwechselversuche dauerten fünf Tage, wobei Körpergewicht, Nahrungsaufnahme und Fäkalgewicht täglich aufgezeichnet wurden. Auf Basis der Laboranalysen von Futter- und Fäkalnährstoffgehalt wurden Verdaulichkeitswerte ermittelt. Am 15. Tag des Versuchs wurden die Tiere eingeschläfert. Obgleich Syphacia muris bei allen Ratten der GI-Gruppe gefunden wurden, zeigten die Tiere keine klinischen Symptome. In unserem Versuch reduzierte eine S. muris-Infektion insgesamt die Verdaulichkeit aller gemessenen Nährstoffe (P < 0,01). Die signifikantesten Unterschiede wurden bei der Verdaulichkeit von Rohfaser- und Mineralstoffen beobachtet (P < 0,01).
Laborratte, Syphacia muris, Infektion, Nährstoff, Verdaulichkeit
El efecto de Sifacia muris en la digestibilidad de nutrientes en ratas de laboratorio
El presente estudio se llevó a cabo para investigar cómo la infección de oxiuros en ratas afecta a la digestibilidad de nutrientes en los huéspedes. Veinticuatro ratas Wistar macho no consanguíneas fueron divididas aleatoriamente en dos grupos de 12 ratas cada uno. Las ratas del primer grupo (GI) se introdujeron en jaulas con nidos con huevos de oxiuros, y el segundo grupo (control) (GII) se introdujo en una sala separada y limpia con jaulas con la parte superior de filtro, y sin contaminar. Los animales fueron introducidos posteriormente en jaulas individuales metabólicas. Las pruebas metabólicas duraron cinco días y se tomaron registros diarios del peso de los animales, la ingesta de comida y el peso de las heces. Basándose en análisis de laboratorio del contenido de nutrientes en los alimentos y las heces, se determinó los valores de digestibilidad. El día 15 del experimento, los animales se sometieron a eutanasia. A pesar de que se encontró Sifacia muris en todas las ratas del grupo GI, los animales no mostraron ningún signo clínico. En nuestro experimento, la infección de S. muris redujo la digestibilidad general de todos los nutrientes medidos (P < 0,01). Las diferencias más significativas en la digestibilidad se observaron en el caso de fibra de crudo y materia mineral (P < 0,01).
rata de laboratorio, Sifacia muris, infección, nutriente, digestibilidad
Effective cryopreservation of golden Syrian hamster embryos by open pulled straw vitrification
Fan Z, Meng Q, Bunch TD, White KL, Wang Z. Lab Anim 2016; 50: 45–53
Cryoconservation efficace des embryons d’hamsters dorés syriens au moyen de la technique de vitrification rapide à l’aide de paillettes étirées
Il est difficile de procéder à la cryoconservation des embryons d’hamsters dorés syriens en raison de leur sensibilité élevée aux cryoprotecteurs et à la manipulation in vitro. L’objectif de cette étude consiste à développer une technique robuste de vitrification rapide utilisant des paillettes étirées (OPS) permettant de cryoconserver des embryons d’hamsters à différents stades de leur développement. Il a d’abord été procédé au test systématique des concentrations de cryoprotecteurs et des temps d’exposition d’embryons à deux cellules à différentes solutions de vitrification. Le prétraitement des embryons à deux cellules suivant a été identifié comme étant le meilleur protocole de vitrification rapide à l’aide de paillettes étirées (OPS): 10% (v/v) d’éthylène glycol (EG) þ10% (v/v) de diméthylsulfoxide (DMSO) pendant 30 secondes, puis une exposition dans la solution de vitrification, EDFS30 (contenant 15% d’EGþ 15% de DMSO), pendant 30 secondes, avant de placer les embryons dans de l’azote liquide (méthode d’exposition comprenant deux étapes).Les ressources offertes par ce protocole permettant de vitrifier des embryons d’hamsters à différents stades de leur développement ont ensuite été étudiées. Les résultats ont indiqué que ce protocole permettait d’obtenir des taux de blastocystes élevés à partir d’embryons vitrifiés au cours des stades à deux cellules, quatre cellules, huit cellules ou au cours du stade morula (62%, 78%, 80% ou 72%, respectivement), mais pas à partir de ceux qui ont été vérifiés aux stades pro-nucléaire (0%) et de blastocystes (24%; P < 0,05). Lorsque les embryons vitrifiés au cours du stade à deux cellules furent récupérés puis directement transférés dans des femelles receveuses, 29% d’entre eux se sont développés jusqu’au terme de la grossesse, un taux de développement qui ne varie pas significativement (P > 0,05) des 40% représentant le taux de natalité au sein des groupes témoins non vitrifiés. En conclusion, il a été élaboré pour les embryons d’hamsters un protocole efficace de vitrification rapide en deux étapes utilisant des paillettes étirées.
hamster, embryon, vitrification rapide à l’aide de paillettes étirées (OPS)
Effektive Kryokonservierung von Embryonen syrischer Goldhamster durch Open Pulled Straw-Vitrifikation
Die Kryokonservierung syrischer Goldhamsterembryonen ist aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit gegenüber Gefrierschutzmitteln und einer In-Vitro-Behandlung schwierig. Ziel dieser Studie war die Entwicklung eines robusten OPS-Verfahrens zur Kryokonservierung von Hamsterembryonen in unterschiedlichen Entwicklungsstadien. Wir testeten zunächst systematisch die Konzentrationen von Gefrierschutzmitteln und die Kontaktzeiten zweizelliger Embryos mit verschiedenen Vitrifikationslösungen. Als optimales OPS-Vitrifikations-Protokoll identifizierten wir die Vorbehandlung zweizelliger Embryos mit 10% (v/v) Ethylenglycol (EG)þ10% (v/v) Dimethylsulfoxid (DMSO) für 30 s, anschließendes Einbringen in die Vitrifikationslösung EDFS30 (bestehend aus 15% EGþ15% DMSO) für 30 s und abschließendes Eintauchen in flüssigen Stickstoff (Zwei-Schritt-Expositionsmethode). Wir untersuchten sodann die Robustheit dieses Protokolls für die Vitrifikation von Hamsterembryos in unterschiedlichen Entwicklungsstadien. Die Ergebnisse zeigten, dass dieses Protokoll hohe Blastozysten-Quoten von Embryos erzielt, die im zweizelligen, vierzelligen, achtzelligen oder Morula-Stadium (62%, 78%, 80% bzw. 72%) eingefroren wurden, nicht jedoch von solchen, die im pronuklearen (0%) oder Blastozysten-Stadium vitrifiziert wurden (24%; P < 0,05). Nach dem Auftauen von im Zweizellen-Stadium eingefrorenen Embryonen und ihrem unmittelbar darauf folgenden Transfer zu empfangenden Weibchen entwickelten sich 29% bis zur Austragung, eine Entwicklungsquote, die sich nicht wesentlich (P > 0,05) von der 40%igen Geburtsquote der nicht eingefrorenen Kontrollgruppe unterschied. Daraus ergibt sich, dass unsere Methode ein effektives Zwei-Schritte-OPS-Vitrifikationsprotokoll für Hamsterembryonen darstellt.
Hamster, Embryo, OPS-Vitrifikation
Criopreservación eficaz de embriones de hámster dorado sirio mediante vitrificación open pulled straw
Los embriones de hámster dorado sirio son difíciles de criopreservar debido a su alta sensibilidad a los crioprotectores y a la manipulación in vitro. El objetivo del presente estudio es desarrollar una técnica de vitrificación open pulled straw (OPS) para criopreservar embriones de hámster en varias fases de desarrollo. En primer lugar, probamos sistemáticamente las concentraciones de crioprotectores y los tiempos de exposición de embriones de dos células a varias soluciones de vitrificación. Identificamos un pretratamiento de embriones de dos células con un 10% (v/v) de etilenglicol (EG)þ 10% (v/v) dimetilsulfóxido (DMSO) durante 30 s seguido de una inmersión en la solución de vitrificación, EDFS30 (que contiene 15% EGþ 15% DMSO), durante 30 s antes de sumergir en nitrógeno líquido (método de exposición en dos pasos) como el protocolo de vitrificación OPS óptimo. A continuación investigamos la iniciativa de este protocolo para vitrificar embriones de hámster en distintas fases de desarrollo. Los resultados demostraron que con este protocolo se consiguieron unos altos índices de blastocistos de embriones vitrificados en dos células, cuatro células, ocho células, o estado de mórula (62%, 78%, 80% o 72% respectivamente), pero no los vitrificados en la fase pronuclear (0%) o de bastocisto (24%; P < 0,05). Cuando se recuperaban embriones vetrificados en la fase de dos células y luego se transferían directamente a hembras recipientes, un 29% de éstas desarrollaron con el tiempo un índice de desarrollo no significativamente distinto (P > 0,05) al del 40% del índice de nacimiento de los controles no vitrificados. En conclusión, hemos creado un protocolo de vitrificación OPS de dos fases para embriones de hámster.
hámster, embrión, vitrificación OPS
Refinement of a thermal threshold probe to prevent burns
Dixon MJ, Taylor PM, Slingsby LC, Murrell JC. Lab Anim 2016; 50: 54–62
Amélioration d’une sonde de seuils thermiques visant à éviter les brûlures
Les essais liés aux seuils thermiques sont couramment utilisés pour les travaux de recherche sur la douleur. Le stimulus peut entraîner des brûlures et mérite une stratégie de prévention. Des modifications de sondes thermiques supposées réduire les brûlures ont été évaluées en termes de fonctionnalité et d’efficacité. Les études ont été réalisées sur deux personnes et huit chats. La sonde non modifiée 0 a été testée sur deux personnes et les modifications prometteuses ont également été testées sur les chats. La sonde 1 offrait un refroidissement rapide une fois le seuil atteint: la sonde 1a était munie d’un système Peltier et la sonde 1b d’un système de refroidissement à eau. La sonde 2 a permis d’éviter immédiatement tout contact avec la peau une fois le seuil atteint. La sonde 3 (développée suite à l’identification de « points chauds » dans la sonde 0) offrait une réduction de la masse thermique et un chauffage uniforme sur la surface de contact avec la peau. La peau humaine a été chauffée à une température de 48oC (6oC au-dessus du seuil) et la brûlure occasionnée a été évaluée sur la base de la zone affectée et d’une simple échelle descriptive (SED). La sonde 1a a permis de refroidir la peau mais a nécessité une dissipation additionnelle de chaleur et une utilisation excessive d’énergie. Par ailleurs, elle ne constituait pas un appareil éprouvé et ne pouvait pas être installée sur des animaux. La sonde 1b a provoqué moins de dommages qu’une sonde n’offrant aucun refroidissement (27 ± 13 et 38 ± 11mm2 respectivement, P = 0,0266; valeur médiane de la SED: 1,5 et 4 respectivement, P = 0,0317), mais elle était encombrante. La sonde 2 était peu maniable et n’a pas été étudiée davantage. La sonde 3 a offert un chauffage uniforme et n’a engendré aucune cloque chez les personnes l’ayant utilisée. Lorsque la sonde 3 a été utilisée sur les chats, après le traitement aux opioïdes, le seuil thermique a été atteint (55oC) 24 fois, une température supérieure à 50oC a été atteinte lors de 32 tests supplémentaires et une température supérieure à 48oC a été atteinte au cours de tous les autres tests. Aucune lésion cutanée n’était visible immédiatement après les tests et une légère hyperémie observée chez trois chats au bout de 2–3 jours a rapidement disparu. La sonde 3 s’est révélée adéquate pour les tests liés aux seuils thermiques.
amélioration, douleur, seuil neuroceptif, chat, thermique
Vervollkommnung einer Wärmeschwellwert-Sonde zur Prävention von Verbrennungen
Das Testen thermischer Schwellenwerte findet in der Schmerzforschung häufig Anwendung. Der thermische Reiz kann Verbrennungen verursachen, deren Prävention anzustreben ist. Modifizierte Wärmeschwellensonden, deren Fähigkeit zur Reduzierung von Verbrennungen angenommen wird, wurden auf Zweckmäßigkeit und Wirkung untersucht. Dazu fanden Studien mit zwei Menschen und acht Katzen statt. Eine nicht modifizierte Sonde 0 wurde bei zwei Menschen getestet, zudem wurden vielversprechende Modifizierungen auch bei Katzen untersucht. Sonde 1 bot schnelle Abkühlung nach Erreichen des Schwellenwertes: Sonde 1a basierte auf einem Peltier-System und Sonde 1b auf Wasserkühlung. Bei Sonde 2 wurde unmittelbar nach Schwellenwerterreichung der Hautkontakt aufgehoben. Sonde 3 (entwickelt mit Blick auf in Sonde 0 festgestellte “Hotspots”) reduzierte thermische Masse und sogar Hitze über die Hautkontaktfläche hinweg. Menschliche Haut wurde auf 48°C (6°C über Schwellenwert) erhitzt und die verursachte Verbrennung anhand der Verletzungsfläche und einer einfachen deskriptiven Skala (simple descriptive scale – SDS) beurteilt. Sonde 1a kühlte die Haut, erforderte aber weitere Hitzeableitung und ein Übermaß an Strom, war nicht ausfallsicher und für die Anbringung an Tieren ungeeignet. Sonde 1b verursachte weniger Schaden als keine Kühlung (27 ± 13 bzw. 38 ± 11mm2, P = 0,0266; SDS-Median 1,5 bzw. 4, P = 0,0317), war aber umständlich zu handhaben. Sonde 2 war unhandlich und wurde nicht weiter bewertet. Sonde 3 erzeugte beim Menschen gleichmäßige Hitze ohne Blasenbildung. Mit Sonde 3 wurde bei Katzen nach Opioid-Behandlung in 24 Fällen der Wärmeschwellen-Abschaltwert (55°C) erreicht, bei weiteren 32 Tests wurden 50°C und bei den restlichen Tests 48°C überschritten. Hautschäden waren unmittelbar nach den Tests nicht erkennbar, und bei drei Katzen an 2–3 Tagen auftretende milde Hyperämie verschwand schnell. Sonde 3 scheint für Tests thermischer Schwellenwerte geeignet zu sein.
Vervollkommnung, Schmerz, nozizeptive Schwelle, Katze, thermal, Wärme
Refinamiento de una sonda de límite térmico para evitar quemaduras
Normalmente se realizan pruebas de límites térmicos para los estudios de dolor. El estímulo puede causar quemaduras y la prevención de beneficios. Se evaluó la funcionalidad y efecto de las modificaciones de las sondas térmicas planteadas como hipótesis para reducir las quemaduras. Se realizaron estudios en dos humanos y ocho gatos. Una sonda 0 no modificada fue probada en dos humanos y se evaluaron unas modificaciones prometedoras en gatos. La sonda 1 incorporó un enfriamiento rápido después de alcanzar el límite: la sonda 1a utilizó un sistema Peltier y la sonda 1b utilizó un enfriamiento con agua. La sonda 2 suministró un contacto con la piel inmediatamente después de alcanzar el límite. La sonda 3 (desarrollada en función de la evidencia de "puntos calientes" en la sonda 0) incorporó una masa térmica reducida y calor equitativo en toda la zona de contacto dérmica. La piel humana alcanzó una temperatura de 48°C (6°C por encima del límite) y la quemadura resultante fue evaluada utilizando una zona de lesiones y una simple escala descriptiva (SDS). La sonda 1a enfrió la piel pero requirió una mayor disipación del calor, poder excesivo, no era "a prueba de fallos" y no era apropiada para la monta de animales. La sonda 1b causó menos daños que no enfriamiento (27 ± 13 y 38 ± 11mm2 respectivamente, P = 0,0266; mediana SDS 1,5 y 4 respectivamente, P = 0,0317) pero era difícil de manejar. La sonda 2 era poco manejable y no se continuó su evaluación. La sonda 3 produjo un calor equitativo sin abrasiones en humanos. Con la sonda 3 en gatos, después de un tratamiento opioide, el límite térmico alcanzó una disyunción (55°C) en 24 ocasiones, excedió los 50°C en otras 32 pruebas y sobrepasó los 48°C en las restantes. No se observó ningún daño evidente en la piel inmediatamente después de las pruebas y una hiperemia leve en tres gatos en 2–3 días se resolvió rápidamente. La sonda 3 parecía ser idónea para la realización de pruebas de límite térmico.
refinamiento, dolor, límite nociceptivo, gato, térmico
The effect of anaesthesia on somatosensory evoked potential measurement in a rat model
Kortelainen J, Al-Nashash H, Vipin A, Thow XY, All A. Lab Anim 2016; 50: 63–66
Effet de l’anesthésie sur les potentiels évoqués somatosensoriels mesurés chez les rats
Les potentiels évoqués somatosensoriels (PES) sont couramment utilisés pour étudier l’intégrité fonctionnelle des voies sensorielles ascendantes. Dans le cadre des études animales, les PES constituent une méthode pratique et peu invasive qui permet d’évaluer de manière quantitative la fonctionnalité du système nerveux. Bien que les PES soient fréquemment utilisés dans les modèles animaux, une attention insuffisante est consacrée au fait qu’ils sont vulnérables à la contamination par des facteurs expérimentaux tels que l’administration d’anesthésiques. Dans le cadre de cette étude, on a analysé chez les rats l’effet de l’isoflurane sur les mesures des PES. L’objectif consistait à identifier les ajustements nécessaires à apporter à l’administration d’anesthésiques en vue d’optimiser la qualité des données obtenues. Deux aspects ont été étudiés: l’effet du dosage d’isoflurane sur les paramètres liés aux PES et sur la reproductibilité des mesures. C’est en utilisant une concentration d’isoflurane d’1,5% que les PES ont présenté le meilleur niveau de qualité. Cette posologie a permis de produire le meilleur rapport signal/bruit et une reproductibilité des mesures équivalente, comparée aux autres dosages. Les conclusions de cette étude peuvent aider à améliorer les protocoles d’anesthésie liés aux mesures des PES chez les rats, et en augmentant la qualité des mesures, elles peuvent potentiellement réduire le nombre de sujets nécessaires pour réaliser des études.
anesthésie, modèle animal, réduction, rongeurs
Auswirkung von Anästhesie auf Messungen somatosensorisch evozierter Potenziale bei einem Rattenmodell
Somatosensorisch evozierte Potenziale (SEPs) dienen häufig zur Untersuchung der Funktionsfähigkeit aufsteigender sensorischer Kanäle. Bei Tierversuchen stellen SEPs eine praktische, minimal invasive Methode zur quantitativen Bewertung der Funktionsfähigkeit des Nervensystems dar. Obgleich sie häufig bei Tiermodellen Einsatz finden, wurde bisher wenig beachtet, dass SEPs anfällig für Kontamination durch versuchsbedingte Faktoren wie Anästhesieversorgung sind. Diese Untersuchung diente zur Feststellung der Auswirkung von Isofluran auf SEP-Messungen bei einem Rattenmodell. Das Ziel bestand darin, die Anpassung der Anästhesieversorgung zwecks Optimierung der Protokolle zu ermitteln. Dabei wurden zwei Aspekte untersucht: die Auswirkung der Isofluran-Dosierung auf die SEP-Parameter und auf die Wiederholbarkeit der Messungen. Es zeigte sich, dass die beste SEP-Qualität beim Einsatz einer Isofluran-Konzentration von 1,5% erzielt wird. Diese Dosierung ergab ein optimales Signal/Rausch-Verhältnis und eine mit anderen Messungen vergleichbare Wiederholbarkeit. Unsere Ergebnisse können zur Vervollkommnung von Narkoseprotokollen für SEP-Messungen bei einem Rattenmodell herangezogen werden und durch die Optimierung der Messqualität potenziell zur Reduzierung der Zahl der für Untersuchungen benötigten Versuchstiere beitragen.
Anästhesie, Tiermodell, Reduzierung, Nager
El efecto de la anestesia en la medición de potenciales evocados somatosensitivos en modelos de rata
Los potenciales evocados somatosensitivos (SSEP) se utilizan ampliamente para estudiar la integridad funcional de vías sensoriales ascendentes. Para estudios con animales, los SSEP representan un método conveniente para evaluar cuantitativamente la funcionalidad del sistema nervioso con baja invasión. A pesar de que se utilizan con frecuencia en modelos de animales, no se presta mucha atención al hecho de que los SSEP son vulnerables a la contaminación de factores experimentales como el suministro anestésico. En este estudio se investigó en una rata el efecto de isoflurano en mediciones SSEP. El objetivo era averiguar los ajustes para el suministro anestésico optimizando la calidad de los registros. Se estudiaron dos aspectos: el efecto de la dosis de isoflurano en los parámetros SSEP y en la repetibilidad de las mediciones. La calidad de los SSEP se encontró que era superior al utilizar una concentración de isoflurano de 1,5%. Esta dosis ofreció el mejor ratio señal/ruido y repetibilidad igual de las mediciones en comparación con otros. Nuestros hallazgos pueden ayudar a refinar los protocolos anestésicos en relación a los registros de SSEP en un modelo de rata y, al mejorar la calidad de las mediciones, reducir potencialmente el número de sujetos necesario para realizar los estudios.
anestesia, modelo animal, reducción, roedores
Neotropical primate nursery in a squirrel monkey breeding unit in Brazil
Meireles BCS, Goldschmidt B, Resende FC, Lopes CAA, Nascimento LWF. Lab Anim 2016; 50: 67–72
Nursery pour primates néo-tropicaux dans une unité d’élevage de singes écureuils au Brésil
Le Saimiri (singe écureuil) est un primate néo-tropical d’origine simienne qui a été élevé en captivité à des fins de recherche sur la santé humaine et animale. Il est fréquemment utilisé dans les études sur l’ophtalmologie, la toxicologie, la pharmacologie, la psychiatrie, les sciences neurologiques, les tests de vaccins et de médicaments (tels que les agents liés au paludisme et à la rougeole), ainsi que dans les études sur les effets observés sur le comportement interactif et sur les connaissances liées à la maladie de Creutzfeldt-Jakob chez l’homme. Les principaux travaux des centres de recherche sur les primates non humains (PNH) concernent essentiellement l’établissement de colonies reproductives autonomes fournissant des animaux expérimentaux de bonne qualité. Le rejet par la mère, la dystocie et la pneumonie sont les principales causes de décès de nouveau-nés parmi ces espèces. Par conséquent, afin de garantir la survie de ces précieux animaux, le Centre d’élevage d’animaux de laboratoire de la Fondation Oswaldo Cruz (CECAL ou Fiocruz) de Rio de Janeiro, au Brésil, a élaboré un protocole lié à l’élevage de ces petits primates dans des nursery.
singes écureuils, nursery, élevage, nouveau-nés, élevage à la main
Pflege neotropischer Primaten in einer Totenkopfaffen-Aufzuchtstation in Brasilien
Saimiri (Totenkopfäffchen) sind neotropische Primaten der Simian-Gattung, die in Gefangenschaft für human- und tiermedizinische Forschungszwecke gezüchtet werden. Sie wurden bisher in großem Umfang für Studien in den Bereichen Ophthalmologie, Toxikologie, Pharmakologie, Psychiatrie, Neurowissenschaft, Impfstoff- und Arzneimitteltests (wie Malaria- und Masernwirkstoffe) sowie im Zusammenhang mit der Untersuchung von Wirkungen auf interaktives Verhalten und Kognition der Creutzfeldt-Jakob-Krankheit beim Menschen eingesetzt. Der Hauptfokus von Forschungszentren für nichtmenschliche Primaten (NHP) liegt auf der Schaffung sich selbst erhaltender Zuchtkolonien zur Bereitstellung wertvoller Versuchstiere. Mütterliche Zurückweisung, Dystokie und Lungenentzündung sind die Hauptursachen für den Tod Neugeborener dieser Tierarten. Um ihr Überleben zu sichern, hat das Versuchstierzucht-Zentrum der Oswaldo Cruz Stiftung (CECAL) in Fiocruz, Rio de Janeiro, Brasilien, ein Protokoll zur Pflege dieser wertvollen Jungtiere in einer Aufzuchtstation erstellt.
Totenkopfaffe, Pflegestation, Aufzucht, Neugeborene, Jungtiere, Handaufzucht
Crianza de primates neotropicales en una unidad de cría de monos ardilla en Brasil
El Saimiri (mono ardilla) es un primate neotropical de género simio que ha sido criado en cautiverio para el desarrollo de estudios de investigación para la salud de humanos y animales. Han sido extensamente utilizados en estudios de oftalmología, toxicología, farmacología, psiquiatría, neurociencia, vacunas y pruebas de medicamentos (como malaria y agentes de sarampión), además de para estudiar los efectos en el comportamiento interactivo y cognitivo de la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob en hombres. La principal preocupación de los centros de investigación de primates no humanos (PNH) se centra en establecer colonias de cría autosostenibles que ofrezcan animales de investigación de buena calidad. El rechazo materno, distocia y la pulmonía son las principales causas de las muertes en los recién nacidos de esta especie. Por tanto, para poder garantizar la supervivencia de estos valiosos animales, el Centro de Cría de Animales de Laboratorio de la Fundación Oswaldo Cruz (CECAL)/Fiocruz, Río de Janeiro, Brasil, ha creado un protocolo para la cría de estos recién nacidos.
Monos ardilla, crianza, cría, neonatos, cría manual